园友接待 规章 你问我答 新手资源 宣传 活动 资源超市 检索 代理 国外 精品 VIP 初级 中级 学术嘉宾 群英会 版主 区版 管委 邀请朋友 (有奖!)

科研经验 投稿 基金 课件 科软 会议 教学 精品馆 互助 硕博 标准求助|共享 书籍 S 考研 考博 英语 资格 公务员 考试精品 工作 留学 交友

数学 物理 化学化工 生命 地学 环境 机械 力学 能源 材料 土建 水利 信息 电力 电子 信息工程 理综 药学 医学 外科 内科 妇儿五官 公卫 医综

文史哲 外语 法学 经济 年鉴 报告 管理与教育 文学原创 零点家园 影音 美图 脑力 体育 健康生活 时尚 心理 美食 医护 电脑网络 百宝箱

返回列表 回复 发帖

[药理学进展] Scid-hu小鼠艾滋病动物模型的造模机制

[药理学进展] Scid-hu小鼠艾滋病动物模型的造模机制

作为一种先天性T、B细胞双重缺陷动物,SCID小鼠为异种移植研究提供了极大的帮助,随着将人淋巴细胞和其他人体组织细胞移植于SCID小鼠而建立SCID-hu小鼠模型的研究迅速兴起,为淋巴细胞分化、肿瘤生物学、感染性疾病、器官移植等方面研究提供了新的途径。目前艾滋病的流行已经严重危害到人类健康和社会的发展,而在艾滋病治疗及疫苗研究方面要取得重大突破,其关键是动物模型。SCID-hu小鼠,即人源化的重症联合免疫缺陷鼠,是研究肿瘤、免疫等很好的动物模型。
人源化小鼠(humanized mice)是指携带有功能性的人类基因、细胞或组织的嵌合体小鼠。该类小鼠由于嵌合有人类特定基因,克服了常规小鼠不能复制某些人类疾病的弊端,是人类疾病模型研究的良好工具。美迪西可以根据客户的需求提供各种有效的动物模型,用来检测药物的有效性,实验动物有非人类灵长动物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、裸鼠等各种种类。
1、人源化小鼠动物模型的造模机制
免疫缺陷动物移植人造血干细胞、胸腺组织或外周血细胞后可建立人源化小鼠。在SCID小鼠体内重建人免疫系统的方法有两种,一种是采用人的成熟或未成熟的淋巴细胞,包括人外周血淋巴细胞PBL、人骨髓细胞、脾细胞或腹腔淋巴结的淋巴细胞,腹腔注射小鼠培育而成的hu-PBL-SCID嵌合小鼠;另一类是采用个体发生中多谱系造血作用的主要器官胎肝组织与婴儿胸腺组织,进行小鼠肾包膜下移植的Scid-hu-Thy/Liv嵌合小鼠。Scid-hu-Thy/Liv小鼠是研究HIV潜伏感染很好的动物模型,可以提供大量的潜伏感染的细胞,确定各种刺激对潜伏感染的影响。
SCID小鼠与非肥胖症糖尿病小鼠(non-obese diabetic, NOD)交配后形成的NOD/SCID小鼠有典型的胸腺淋巴瘤病样改变,体内T、B细胞功能缺陷,NK细胞功能下调。NOD/SCID小鼠与IL-2受体;链基因敲除小鼠交配后形成的NOD-Scid-IL2rg -/-小鼠能提高移植物生存率,NOD-Scid-IL2rg -/-小鼠有两种不同的亚型:NOG和NSG小鼠。NOG和NSG小鼠是病毒学研究中良好的模型动物。
Rag2 -/- IL2rg -/-是另一种可用于HIV-1感染研究的人源化小鼠,重组激活基因2(recombination-activating gene 2,Rag2)基因缺失后会导致小鼠T和B淋巴细胞功能不全,Rag2 -/-小鼠和IL2rg -/-小鼠杂交后产生的纯合子 Rag2 -/- IL2rg -/-小鼠T细胞、B细胞和NK细胞功能丧失,适宜外来移植物的生存,可用做HIV动物模型研究。
供体组织、细胞异种移植给免疫缺陷动物后,移植物可在免疫缺陷动物体内增殖、扩散,且保持原供体移植物的生物学功能。用于HIV-1模型研究的人源化小鼠,多数嵌合人免疫细胞或器官,如人CD34+造血干细胞、胸腺组织、淋巴细胞或胎肝细胞等,这为HIV-1病毒感染提供了良好的靶器官,有利于HIV-1病毒在人源化小鼠体内增殖。
2、人源化小鼠艾滋病动物模型的造模方法
Scid-hu-Thy/Liv小鼠麻醉后,手术方法暴露肾包膜部位移植物,HIV病毒直接接种到移植物内复制HIV-1感染模型。Scid-hu-PBL小鼠可通过腹腔接种HIV-1的方法建立感染模型。其他人源化小鼠大多采用静脉接种的方法建立HIV-1病毒感染模型。
HIV-1病毒接种到Scid-hu-Thy/ Liv小鼠机体内人移植物中后导致CD4+T细胞数量下降,移植物中可检测到高病毒载量。该模型可用于研究CD4+T细胞下降机制和评价抗病毒药物对急性期HIV-1感染的作用。腹腔接种HIV-1或将感染HIV-1的人细胞移植给Scid-hu-PBL小鼠后引起小鼠CD4+T细胞数量下降,人PBL中可检测到HIV-1病毒。该模型可用于验证抗HIV-1 Env糖蛋白单克隆抗体的治疗作用、基于Env疫苗的保护作用及评价致敏树突状细胞对HIV-1感染的治疗作用。
但Scid-hu-Thy/Liv和Scid-hu-PBL小鼠模型不能用于HIV-1病毒黏膜途径传播研究。HIV-1或 SHIV接种到NSG、NOG小鼠后。小鼠血浆中可检测到高水平病毒血症及HIV-1特异性抗体,多个脏器中均可检测到HIV-1病毒的存在。NSG及NOG小鼠模型常用来探索基因治疗对HIV-1病毒复制的抑制作用,此外NSG小鼠也是HIV-1诱导的神经致病性良好模型。BLT小鼠腹腔接种HIV-1后,可持续出现高水平病毒血症,CD4T细胞数量下降及产生病毒特异性的体液和细胞免疫应答反应。 Rag2-/-IL2rg-/-小鼠通过腹腔途径感染HIV-1病毒后,病毒血症在该模型小鼠可持续一年以上,CD4T细胞明显下降且多个组织中均可检测到病毒的存在。
人源化小鼠以HIV-1病毒感染后,通过以下几个指标对模型进行评价:流式细胞术检测外周血及其他器官中CD4+、CD8+细胞数量及CD4+/CD8+比值;分离外周血或器官中HIV-1病毒,测定血浆病毒载量,或通过PCR方法对感染外周血或器官中HIV-1 DNA定量;分离血清,检测抗HIV-1抗体;其他AIDS相关体征,如腹泻、消瘦、机会感染等。
SCID-hu嵌合小鼠作为HIV研究的模型之一,其不足之处在于:
(1)该动物模型需要人工构建,构建的过程也较复杂,目前的技术仍不能提供充足的动物进行大规模的试验;
(2)由于该模型移植的是人胎儿组织,有些研究结果适用于HIV婴幼儿患者,可能与成人生理相差较大;
(3) SCID-hu嵌合小鼠对外源微生物很敏感,需要在SPF级屏障系统中繁育,其饲养和维修费用较昂贵;
(4)人的“Thy/Liv”移植物处在鼠环境中受到一些鼠细胞、鼠源因子等的干扰,而一些对人类细胞有重要作用的因子如激素、维生素等在小鼠体内可能缺失。


评分记录
  • chenws   金币  +5   感谢您一直支持!   18-9-4 18:36


http://www.mediiclon.com.cn 生[url][/url]物医药CRO
感谢您一直支持!


返回列表

零点花园属于纯学术、非经营性专业网站。

大家出于学习和科研目的进行交流讨论,如有涉侵犯著作权人的版权等信息,请及时来信告知,我们将在3个工作日内做出相应的处理,并给予相应的答复,谢谢。

辽宁网警

辽宁网警